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上海炎熙生物科技有限公司

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供應(yīng) 探針?lè)ㄖгw污染實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒
規(guī)  格:
20次反應(yīng)
價(jià)  格:
1280/
數(shù)  量:
10000
 交貨地:
快遞
發(fā)布時(shí)間:
2025-01-15
 有效期:
255天
備  注:
探針?lè)ㄖгw污染實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒
Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Contamination


貨號(hào):Myco-qt-20     規(guī)格:20次反應(yīng)
貨號(hào):Myco-qt-50     規(guī)格:50次反應(yīng)
貨號(hào):Myco-qt-100    規(guī)格:100次反應(yīng)
儲(chǔ)存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反復(fù)凍融。


試劑盒特點(diǎn):
1, 對(duì)柔膜菌綱(包括支原體、螺原體和無(wú)膽甾原體)有極強(qiáng)的特異性,與柔膜菌綱以外的其他基因組無(wú)交叉反應(yīng)??蓹z出歐洲藥典要求的所有支原體種類。
2, 靈敏度高,最低可檢出反應(yīng)液中2-86個(gè)基因組。
3, 使用熱啟動(dòng)DNA聚合酶,可抑制非特異性擴(kuò)增,降低背景熒光。
4, 帶有陽(yáng)性對(duì)照樣品,可用于檢驗(yàn)試劑盒有效性。
5, 帶有UDG酶,可降低殘留污染。


支原體(Mycoplasma)是一種直徑約為0.1-0.3 μm、無(wú)細(xì)胞壁的原核生物,屬于柔膜菌綱(Mollicutes),常被用作柔膜菌綱的統(tǒng)稱。支原體具有變形能力,可透過(guò)常見(jiàn)過(guò)濾膜(0.22-0.45 μm),因此常規(guī)的無(wú)菌過(guò)濾方法不能將其去除,靶向細(xì)胞壁的抗生素也對(duì)其無(wú)效。由于在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法判斷,細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染是一個(gè)令人煩惱的問(wèn)題。支原體種類繁多,目前已知的污染細(xì)胞的支原體有20多種,一般是由試劑和人工操作帶入,95%的污染事件是由常見(jiàn)的五種支原體引起;由原代細(xì)胞的原始組織帶入而形成的污染也有發(fā)生,污染的支原體種類分布較為廣泛。根據(jù)細(xì)胞類型、來(lái)源和培養(yǎng)方法的不同,文獻(xiàn)報(bào)道的細(xì)胞污染率在15-80%之間,極大影響了下游實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行,因此必須使用專門(mén)的方法檢測(cè)這些污染。
傳統(tǒng)的培養(yǎng)法操作比較繁瑣,需要很長(zhǎng)時(shí)間(最長(zhǎng)需要28天),受操作人員的實(shí)驗(yàn)技能影響比較大,并且有些支原體種類不能體外培養(yǎng)。而PCR法可有效克服上述缺點(diǎn)。本試劑盒采用探針?lè)▽?duì)細(xì)胞污染進(jìn)行PCR檢測(cè),使用通用性探針和引物,可識(shí)別超過(guò)150種支原體。常見(jiàn)的污染類型,如:豬鼻支原體(Mycoplasma hyorhinis)、唾液支原體(Mycoplasma salivarium)、口腔支原體(Mycoplasma orale)、精氨酸支原體(Mycoplasma arginini)、萊氏無(wú)膽甾原體(Acholeplasma laidlawii)、發(fā)酵支原體(Mycoplasma fermentans)和肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae),均可以檢出。根據(jù)易感程度和與人類的密切程度,選取12種支原體進(jìn)行驗(yàn)證,靈敏度最高可達(dá)到每反應(yīng)2個(gè)基因組,大部分種類靈敏度分布在每反應(yīng)2-12個(gè)基因組,最低的是解脲脲原體,靈敏度為每反應(yīng)86個(gè)基因組。本試劑盒適用于檢測(cè)歐洲藥典要求的所有支原體種類,大部分種類可以達(dá)到歐洲藥典要求的10 CFU/ml的靈敏度,考慮到支原體培養(yǎng)條件和菌株活性的差異,少數(shù)種類的支原體難以判斷是否符合這個(gè)要求。引物具有柔膜菌/支原體特異性,與真核生物無(wú)交叉反應(yīng),即使與親緣關(guān)系較近的革蘭氏陽(yáng)性菌,如:丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)和肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae),也無(wú)交叉反應(yīng)。本試劑盒適用于細(xì)胞治療產(chǎn)品和細(xì)胞培養(yǎng)物中的支原體污染檢測(cè),也可用作支原體通用檢測(cè)。
試劑盒包含熱啟動(dòng)DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探針、陽(yáng)性對(duì)照品。探針在5`-端以FAM修飾,3`-端以MGB修飾。DNA聚合酶源自極端嗜熱菌(Thermus thermophilus),經(jīng)改造后較普通的Taq酶具有更強(qiáng)的抗抑制能力和熱穩(wěn)定性。通過(guò)結(jié)合特異性單克隆抗體,在室溫下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循環(huán)的熱變性階段,抗體受熱被去除,此時(shí)DNA聚合酶活性恢復(fù),因此獲得“熱啟動(dòng)”功能。熱啟動(dòng)可減少殘余DNA的污染,提高PCR擴(kuò)增效率、靈敏度和目的片段產(chǎn)量。


相關(guān)產(chǎn)品:
支原體污染PCR檢測(cè)試劑盒,貨號(hào): Myco-P-20,Myco-P-50,Myco-P-100
染料法支原體污染實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒,貨號(hào): Myco-qs-20,Myco-qs-50,Myco-qs-100
探針?lè)ㄖгw污染實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒,貨號(hào): Myco-qt-20,Myco-qt-50,Myco-qt-100
支原體清除劑,貨號(hào):Myco-E-h,Myco-E-1,Myco-E-5

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