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糜蛋白酶
CAS No.: 9004-07-3
分子式: N/A
分子量: 74.92
備注: 中文名稱糜蛋白酶中文同義詞ALPHA-胰凝乳蛋白酶;糜蛋白酶;α-糜蛋白酶;胰凝乳朊酶;Α-胰凝乳蛋白酶,從牛胰所得(3*再結晶,用20%的乙醇去除鹽,鈣的存在增加了它的活性和穩(wěn)定性);Α-胰凝乳蛋白酶(牛胰);Α-胰凝乳蛋白酶,從牛胰所得(3*再結晶,用的乙醇去除鹽,鈣的存在增加了它的活性和穩(wěn)定性);ALPHA-胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶英文名稱α-Chymotrypsin英文同義詞quimotrase;zolyse;TLCK-CHYMOTRYPSIN;ALPHA-CHYMOTRYPSIN,TLCKTREATED;ALPHA-CHYMOTRYPSINTYPEI-S;ALPHA-CHYMOTRYPSINTYPEVI;ALPHA-CHYMOTRYPSINTYPEVII;ALPHA-CHYMOTRYPSINCAS號9004-07-3分子式N/A分子量0EINECS號232-671-2相關類別醫(yī)藥與生物化工;原料藥;呼吸系統(tǒng)藥物;酶;輔酶/酶;酶制劑,生化試劑;氨基酸;分子生物學;醫(yī)藥原料;重組蛋白酶;溶劑;無機化合物和鹽;化學試劑;ProteolyticEnzymesandSubstrates;ProteolyticEnzymesEnzymeClassIndex;SelectiveProteolyticEnzymes;3.x.x.xHydrolases;Proteases&ProteinSequencing;ProteasesEnzymes,Inhibitors,andSubstrates;EnzymeClassIndex;Chymotrypsin,alpha-MassSpectrometry;EnzymaticandChemicalProteinCleavage;ProteasesforCleavageofProteinsEnzymes,Inhibitors,andSubstrates;酶類;生物化學品;治療用酶;生化試劑;enzyme;氨基酸類;蛋白酶;酶與輔酶;醫(yī)藥血管舒張藥;酶制劑;生化試劑-酶類;有機化工原料;生化試劑-酶和輔酶;日用化學品;試劑盒-生化試劑盒;對照品;3.4.x.xPeptidases;Chymotrypsin,alpha-ApplicationIndex;ProteasesApplicationIndex;ProteinSequencingEnzymes,Inhibitors,andSubstrates;ApplicationIndex;ProteasesEnzymeClassIndex;API;Lyophilized;WhitelyophilizedMol文件MolFile結構式糜蛋白酶性質熔點127°C密度1.37[at20℃]蒸氣壓0Paat25℃儲存條件-20°C溶解度在1mMHCl中復溶。在1mMHCl中溶解度為10mg/ml。2mM氯化鈣用作穩(wěn)定劑。在-20°C下儲存分裝的溶液長達一周。形態(tài)無鹽凍干粉顏色白色水溶解性125g/Lat25℃Merck13,2282LogP-1.3at20℃EPA化學物質信息Chymotrypsin(9004-07-3)糜蛋白酶用途與合成方法化學性質α-糜蛋白酶系自?;蜇i胰中提取的一種蛋白分解酶,為白色或類白色結晶粉末。無氣味,易溶于水,不溶于有機溶劑。等電點PI=8.1~8.6。水溶液中會迅速失活。10%的水溶液Ph值約為3,以Ph3~4的水溶液最穩(wěn)定。干態(tài)穩(wěn)定,在40C條件下,18個月無降低活力現象。注射用糜蛋白酶為糜蛋白酶的無菌凍干品,為白色凍干塊狀物。水溶液不穩(wěn)定,宜新鮮配制。用途α-糜蛋白酶可作為蛋白分解酶。一般用于手術后創(chuàng)口或創(chuàng)傷愈合、抗炎及防止局部積血、水腫、扭傷血腫、乳房手術后局腫脹、鼻炎、中耳炎等。用于白內障摘除、松解睫狀肌韌帶,以減少膜破裂和視網膜損傷。但是,用前須做過敏試驗,不可靜注,注射部位可間生疼痛和腫脹,肌注偶可引起過敏性休克,還可引起中度眼色素層炎,角膜水腫和暫時性青光眼。嚴重肝臟患者、凝血功能不正常、玻璃體不固定的創(chuàng)傷性白內障患者及不滿20歲患者忌用。白內障摘除術;配1/5000生理鹽水溶液沖洗,由瞳孔注入后房,經2~3min,在晶體浮動后,以生理鹽水沖洗,即可取出晶狀體。肌注,每次5mg,每日1~2次,濕霧或噴霧:每日5mg,氣溶療法,每次0.2~Chemicalbook0.3mg(加蒸餾水2~3ml),一日3~4次;氣管滴入,配成每ml含本品0.5mg溶液,適量滴入。用途用于生化研究,蛋白質的結構分析、分解和消化,臨床上用于創(chuàng)傷或手術后創(chuàng)口愈合、抗炎及防止局部水腫、積血、扭傷血腫、中耳炎、鼻炎等。用途該品為蛋白分解酶類藥物。能促使血凝塊、膿性分泌物和環(huán)死組織等的液化消除,用于眼科手術以松解睫狀韌帶、減少創(chuàng)傷性虹膜睫狀體炎。亦可用于創(chuàng)口或局部炎癥以減少局部分泌和水腫。用途用于外科各種手術后外傷的血腫、水腫、關節(jié)積血等用途一種絲氨酸蛋白酶,水解肽鍵的羧基端帶有芳香或長疏水鏈(Tyr,Trp,Phe,Met)的肽鍵。備注:用于沒有外源胰蛋白酶活性存在條件下的蛋白質水解。生產方法牛宰殺后1h內取出胰臟,用硫酸在0℃浸取。浸取液用硫酸銨分級鹽析,鹽析物溶于冷蒸餾水(用硫酸調節(jié)pH),再用硫酸銨和氫氧化鈉調節(jié)pH,使結晶完全,反復溶解,再結晶,得到糜蛋白酶元結晶。將糜蛋白酶元結晶活化、鹽析、透析、干燥,即得糜蛋白酶。生產方法以牛胰臟為原料,經提取、分級鹽析后先制成胰凝乳蛋白酶原,經胰蛋白酶激活后,再用硫酸銨、乙醇重結晶精制而得。生產方法絞碎、提取牛宰殺后,迅速取出牛胰(一般在0.5~1h內),洗凈,去掉脂肪、結締組織等雜物,立即浸入預先冰凍好的硫酸溶液(0.125mol/L)中,驟然冷卻,在0C左右保存,待積滿100kg后投料。取胰投入絞肉機中絞碎成胰漿(必要時應絞3次),加入胰漿2倍量的冰冷硫酸(0.125mol/L)。置冷室中,每1~2h攪拌1次,浸漬提取24h。浸漬物用粗濾袋(或二層紗布)過濾,濾干后濾渣再用1倍量冷硫酸液(0.125mol/L重復上過程,再進行過濾,棄濾渣,合并2次濾液,每升濾液中加入固體硫酸銨使?jié)舛葹?42g,此時硫酸銨濃度達到40%飽和度,冷室放置,過夜,虹吸上清液,底層沉淀加入適量硅藻土作助濾劑,減壓過濾,上清液和濾液合并,得提取液。牛胰冰冷H2SO4→提取提取液分級鹽析、結晶每升提取液中加入固體硫酸銨205g,使硫酸銨濃度達到70%飽和度,冷室放置過夜,次日上層清液棄去,底層沉淀減壓過濾至干,加入3倍于濾餅重的冰水使之溶解,重復用硫酸銨40%和70%飽和度分級沉淀,取第2次70%飽和度沉淀濾餅,加入1.5倍于濾餅重的冰水溶解,并加入0.5倍濾餅重量的飽和硫酸銨溶液,用氫氧化鈉(5mol/L)調Ph5,于250C恒溫箱中靜置,保溫48h進行結晶(取結晶液一滴置載玻片上用100倍顯微鏡觀察,應有明顯針狀結晶),再將結晶減壓抽濾至干,得糜蛋白酶原粗制品,按牛胰質量計算,收率5%~6%。取粗制胰蛋白酶原加入7倍量冰冷蒸餾水,使之溶解,并滴加硫酸(2.5mol/L)調節(jié)Ph達到2左右,溶液置布氏漏斗上用酸洗滑石粉過濾,濾液應澄清,再加入2倍量飽和硫酸銨溶液,滴加氫氧化鈉(5mol/L)中和酸度使Ph為5左右,在20~250C條件下,保溫靜置4h以上,即有白色沉淀析出,顯微鏡下觀察為棒狀結晶,過濾棄濾液,沉淀再按此法重復結晶3次,得糜蛋白酶原結晶。提取液(NH4)2SO4→分級鹽析沉淀(NH4)2SO4;NaOH;Ph4^→結晶糜蛋白酶原活化、鹽析、結晶稱取糜蛋白酶原結晶,加入3倍于該量的冰冷蒸餾水并滴加硫酸溶液,使之溶解,然后加入等量的Ph7.6磷酸鹽緩沖溶液(0.5mol/L)和一定量的氫氧化鈉[與(2)中2.5mol/L硫酸的物質量相當],使Ph保持在7.6,再在每100g的糜蛋白酶原中加入150倍以上的胰蛋白酶5mg。置于50C的冰箱中,使之活化48h。用硫酸(0.5mol/L)調節(jié)Ph達到4左右,在每升的活化液中加入固體硫酸銨0.5kg,鹽析并放置2h,溶液置布氏漏斗減壓過濾,棄去濾液,沉淀物用3/4倍量的硫酸(0.005mol/L),酸洗滑石粉澄清,加入少量晶種,于20~250C靜置24h,當大量的結晶生成時,過濾,即得糜蛋白酶結晶。糜蛋白酶原冰冷;胰蛋白酶;50→活化活化H2SO4;Ph4→鹽析;結晶糜蛋白酶結晶透析、滅菌、干燥稱取糜蛋白酶結晶,加入3倍于該量的蒸餾水,并滴加硫酸溶液(0.005mol/L),使之溶解,每350ml裝入一個透析袋中,使透析袋浸于50的水浴中,并使內外溶液處于同一平面上,用水連續(xù)透析2~3d,透析應完全。糜蛋白酶結晶50→透析透析液冷凍;減壓→滅菌;干燥成品
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